期刊简介

               本刊创刊于1973年,是一本由卫生部主管的高级医学学术刊物,以报道肿瘤临床和基础理论方面的研究成果及新动态、新进展为主。读者对象为肿瘤防治研究工作者及相关专业的各级医务人员。                

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  • 杂志名称:肿瘤防治研究杂志
  • 主管单位:中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会
  • 主办单位:湖北省卫生厅;中国抗癌协会;湖北省肿瘤医院
  • 国际刊号:1000-8578
  • 国内刊号:42-1241/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中国学术期刊综合评价数据库来源期刊期刊收录:农业与生物科学研究中心文摘, 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 哥白尼索引(波兰), CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 剑桥科学文摘, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
肿瘤防治研究杂志2009年第04期

survivin shRNA重组腺病毒的构建及其对人肺癌细胞A549的作用

谢富华;王润秀;李昌武;覃燕梅;梁念慈

关键词:survivin, 重组腺病毒, RNAi
摘要:目的 构建携带人生存素survivin短发夹RNA(shorthairpin RNA,shRNA)表达载体的重组腺病毒,以此介导小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)药物对人A549细胞肺癌的治疗,为下一步动物实验研究提供基础.方法 将前期实验中构建并筛选的重组质粒pShune-survivin与携带LacZ标签的腺病毒骨架质粒共转染HEK-293 T细胞,经同源重组产生重组腺病毒Ad-survivin;经PCR鉴定并测定病毒滴度;β-gal染色检测病毒时人肺癌细胞A549的感染效率;MTT实验和流式细胞术检测其对A549细胞的作用;半定量RT-PCR检测RNAi效果;Hoeehst染色观察凋亡情况.结果 PCR证实重组腺病毒Ad-survivin构建成功;β-gal染色表明感染效率明显;A549细胞增殖受到抑制并阻滞于G2/M期;survivin mR-NA的表达受到抑制;荧光染色发现有凋亡细胞.结论 成功构建人survivin基因shRNA表达载体的重组腺病毒,下调survivin表达后能诱导A549细胞凋亡,为研究肺癌RNAi途径的基因治疗奠定基础.